СОРБЦИЯ ТИРОЗИНА И ТРИПТОФАНА СУЛЬФОЭТИЛИРОВАННЫМ ПОЛИАМИНОСТИРОЛОМ
Вахитова А.Э., Ильин В.А., Петрова Ю.С., Лебедева Е.Л.
Уральский федеральный университет
620002, г. Екатеринбург, ул. Мира, д. 19
Точное определение аминокислот (АК) необходимо ввиду их участия в ключевых биохимических процессах. Капиллярный электрофорез в сочетании с сорбционным концентрированием позволяет повысить чувствительность анализа, при этом ранее сульфоэтилированные аминополимеры показали высокую эффективность для извлечения АК.
Цель работы заключалась в исследовании процессов сорбции ароматических аминокислот (тирозина и триптофана) материалом на основе сульфоэтилированном полиаминостирола с последующим количественным определением аминокислот методом лигандообменного капиллярного электрофореза. В качестве сорбента использовали сульфоэтилированный полиаминостирол со степенью замещения 1,0 и 1,5 в цинковой форме (СЭПАС 1,0 и СЭПАС 1,5).
Определение аминокислот проводили на приборе «Капель-105М» с использованием стандартного кварцевого капилляра. В качестве рабочего буфера служил аммиачно-ацетатный раствор с добавлением ионов Cu²⁺ (pH 5,5). В ходе работы было выявлено, что при одновременном присутствии нескольких аминокислот в пробе их пики на электрофореграмме перекрываются, что создает трудности для точного количественного анализа.
Установлено, что для сорбции трирозина и триптофана на сульфоэтилированном полиаминостироле в цинковой форме оптимальное значение pH в статических условиях составляет 9,0–10,0. При данных условиях максимальная степень извлечения тирозина достигает 30 %, триптофана – 76 %. При этом варьирование степени модифицирования сорбента не оказывает существенного влияния на эффективность извлечения аминокислот.
В динамических условиях пропускали растворы АК (V = 50,0 см3, аммиачно-ацетатный буферный раствор, pH 9,0) через концентрирующий патрон, заполненный СЭПАС 1,5 массой 0,1000 г, со скоростью 2 см3/мин. Выходящий из патрона раствор собирали порциями по 10,0 см3. Установлено, что триптофан из растворов извлекается количественно, сорбционная емкость до проскока составила 1,19 мкмоль/г. Для тирозина в данных условиях наблюдается проскок в первых порциях элюата.
Изучена десорбция тирозина и триптофана с поверхности СЭПАС 1,5 в динамических условиях. При использовании в качестве десорбента соляной кислоты (pH 2,0, скорость пропускания через патрон 2 см3/мин) степень десорбции для триптофана достигает 50 %, а для тирозина 100 %.
Таким образом, СЭПАС является перспективным материалом для концентрирования и разделения тирозина и триптофана.